Комплекс SCF

Ко́мплекс SCF (аббревиатура слагается из начальных букв трёх субъединиц комплекса: Skp1, Cul1, F-box) — белковое соединение, играющее существенную роль в регуляции клеточного цикла. В структуре комплекса, прежде всего, выделяют ядро, состоящее из трёх субъединиц: структурообразующего белка куллина, каталитического RING-домена^[en] и адаптерного белка^[en]. Через RING-домен с ядром комплекса SCF соединяется убиквитин-конъюгирующий фермент^[en], который обеспечивает перенос молекулы убиквитина на белок-мишень. Через адаптерный домен с комплексом SCF соединяется субстрат-специфичный домен, обеспечивающий связывание целевого белка^[1].

Функционально комплекс SCF представляет собой убиквитинлигазу и катализирует убиквитин-зависимый протеолиз белков-мишеней. На протяжении всего клеточного цикла ядро комплекса SCF пребывает в активном состоянии^[1][2], но активность всего комплекса целиком регулируется двумя факторами: во-первых, присоединением соответствующего субстрат-специфичного домена, распознающего и связывающего целевые белки и, во-вторых, в большинстве случаев, мишени комплекса SCF должны быть фосфорилированы для их распознавания субстрат-специфичным доменом^[1][3].

Важную роль комплекс SCF играет при переходе клетки из фазы G₁ в S-фазу. На данном этапе SCF обеспечивает убиквитинирование и последующий протеолиз ингибиторов циклин-зависимых киназ^[4], что ведёт к образованию циклин-киназных комплексов G₁/S-Cdk, которые в свою очередь обеспечивают G₁/S-переход^[3].

Ещё одной установленной функцией комплекса SCF является участие в регуляции M-фазы. На данном этапе SCF, во-первых, убиквитинирует протеинкиназу Wee1^[en], способствуя тем самым активации митотических циклин-киназ M-Cdk. Во-вторых, SCF убиквитинирует Emi1 — белок-ингибитор комплекса APC, обеспечивая переход клетки в анафазу митоза^[3].

Строение и классификация

В структуре комплекса SCF прежде всего выделяют ядро, состоящее из трёх субъединиц: структурообразующего белка куллина, каталитического RING-домена и адаптерного белка. Через RING-домен с ядром комплекса SCF соединяется убиквитин-конъюгирующий фермент (E2), который обеспечивает перенос молекулы убиквитина на белок-мишень. Через адаптерный домен с комплексом SCF соединяется субстрат-специфичный домен, обеспечивающий связывание целевого белка^[1].

Аббревиатура SCF слагается из начальных букв трёх субъединиц комплекса: Skp1^[en] (англ. S-phase kinase-associated protein 1 — «белок ассоциированный с киназами S-фазы 1»), Cul1 (англ. cullin 1 — «куллин 1»), F-бокс (англ. F-box)^[1].

На основании структурных различий выделяют как минимум три типа комплексов SCF: SCF1, SCF2 и SCF3. Порядковые номера служат для обозначения соответствующего куллина, входящего в состав SCF: Cul1, Cul2 или Cul3. Помимо этого, все три комплекса SCF различаются адаптерными доменами: для SCF1 — это Skp1, для SCF2 — EloB/C (англ. elongin B/C — «элонгин B/C»), а в комплексе SCF3 субстрат-специфический домен (BTB или POZ) контактирует непосредственно с субъединицей куллина Cul3, то есть выполняет одновременно субстрат-связующую и адаптерную функцию. Каждая группа SCF также различается характерным типом субстрат-специфического домена: для SCF1 — это белки группы F-box, для SCF2 — белки группы BC-box, для SCF3 — домен BTB/POZ^[en] (англ. BTB — broad complex/tramtrack/bric-a-brac; POZ — poxvirus zinc finger protein — «цинкосодержащий пальцевидный белок поксвируса»). Единственным общим элементом для всех трёх типов SCF является RING-домен — Rbx1^[en] (англ. RING box protein-1 — «белок RING-бокс 1»), также называемый Roc1 (англ. regulator of cullins-1 — «регулятор куллинов 1»)^[5][6].

Функции

Комплекс SCF относится к подподклассу ферментов убиквитинлигаз и катализирует реакции убиквитинирования — ковалентного присоединения молекул убиквитина к целевым белкам. При этом маркированные в результате убиквитинирования целевые белки распознаются и расщепляются в 26S протеасомах. Распознавание целевых белков обеспечивает субстрат-специфичный домен в совтаве комплекса SCF^[1][7].

Несмотря на структурное разнообразие SCF-подобных комплексов, пока остаётся неизвестной роль большинства из них. Фактически установлена роль лишь для комплексов группы SCF1 (Skp1-Cul1-Rbx1-F-box)^[5]. При этом даже в пределах группы SCF1 насчитывается порядка 70 различных субстрат-специфичных доменов F-box, о функциях которых, в большинстве случаев, также пока мало известно^[2].

Главной установленной функцией комплекса SCF является участие в регуляции клеточного цикла. Реализация данной функции обеспечивается соответствующими субстрат-специфичными доменами группы F-box: Skp2^[en] (англ. S-phase kinase-associated protein 2 — «белок, ассоциированный с киназами S-фазы 2»), Fbw7 (англ. F-box and WD repeat domain-containing 7 — «домен F-бокс, содержащий WD-повтор 7»), β-TRCP^[en] (англ. beta-transducin repeat containing protein — «белок, содержащий повторные участки бета-трансдуцина»)^[2]. Домен Skp2 позволяет комплексу SCF контролировать активность следующих регуляторов клеточного цикла: циклина D1, циклина E^[en], p130^Rb2, E2F1, а также активность группы ингибиторов циклин-зависимых киназ — p27^kip1 (p27), p21^{Waf1/Cip1/Sdi1} (p21), p57^kip2 (p57). С участием домена Fbw7 обеспечивается контроль регуляторов: c-myc, c-jun^[en], циклина E, Notch. Домен β-TRCP даёт контроль над двумя важными регуляторами активности митотических циклин-зависимых киназ — киназой Wee1 и фосфатазой Cdc25^[en]. Помимо этого, β-TRCP контролирует активность бета-катенина и Emi1^[2].

В течение интерфазы комплекс SCF регулирует активность следующих субстратов: Cdc25A^[en]; циклина D1; циклина E; циклин-зависимой киназы 2 (Cdk2); фактора репликации ДНК — Cdt1^[en]; белка p130; ингибиторов циклин-зависимых киназ — p21, p27, p57^[en]; транскрипционного фактора E2F1. Важную роль комплекс SCF играет при переходе клетки из фазы G₁- в S-фазу. На данном этапе SCF^Skp2 обеспечивает убиквитинирование и последующий протеолиз ингибиторов циклин-зависимых киназ^[4]. что ведёт к образованию циклин-киназных комплексов G₁/S-Cdk, которые в свою очередь обеспечивают G₁/S-переход. По окончании перехода из G₁-фазы в S-фазу G₁/S-циклины (циклин E, циклин D1) разрушаются при участии комплекса SCF^[3].

Вторым важным участком, на котором тоже реализуются функции комплекса SCF, является M-фаза. На данном этапе SCF^β-TRCP, во-первых, убиквитинирует протеинкиназу Wee1, способствуя тем самым активации митотических циклин-киназ M-Cdk. Во-вторых, SCF^β-TRCP убиквитинирует Emi1 — белок-ингибитор комплекса APC, обеспечивая переход клетки в анафазу митоза^[3].

Регуляция

На протяжении всего клеточного цикла ядро комплекса SCF пребывает в активном состоянии^[1][2], но активность всего комплекса целиком регулируется двумя факторами: во-первых, присоединением соответствующего субстрат-специфичного домена, распознающего и связывающего целевые белки, и, во-вторых, в большинстве случаев мишени комплекса SCF должны быть фосфорилированы для их распознавания субстрат-специфичным доменом^[1][3].

В плане регуляции стоит также отметить взаимодействие комплекса SCF с ещё одной регуляторной убиквитинлигазой клеточного цикла — комплексом стимуляции анафазы (англ. APC).

Обе убиквитинлигазы — SCF и APC — могут контролировать активность одних и тех же субстратов. Например, у делящихся дрожжей циклин S-фазы (Cig2) контролируется и со стороны APC, и со стороны SCF^Pop1/2[4]. В клетках человека сходный двусторонний контроль наблюдается применительно к фосфатазе Cdc25A. На протяжении фазы G₁ активность Cdc25A сдерживается комплексом APC^Cdh1. После этого, в S-фазе клеточного цикла, SCF^β-TRCP контролирует активность Cdc25A в зависимости от наличия повреждений ДНК^[4][8].

Ещё одной особенностью SCF и APC является взаимозависимая регуляция активности обеих убиквитинлигаз. В течение фазы G₁ комплекс APC^Cdh1 участвует в убиквитинировании субстрат-распознающей субъединицы Skp2, тем самым достигается сдерживаение активности комплекса SCF. Далее, при переходе клетки из фазы G₁ в S-фазу, активированный комплекс SCF^Skp2 обеспечивает убиквитинирование и последующий протеолиз ингибиторов циклин-зависимых киназ, что ведёт к образованию циклин-киназных комплексов G₁/S-Cdk (например, циклин A-Cdk2). Активированные циклин-киназы G₁/S-Cdk фосфорилируют субъединицу Cdh1, деактивируя, таким образом, комплекс APC. Наконец, в ранней M-фазе SCF^β-TRCP инициирует протеолиз Emi1 — белка-ингибитора субъединицы Cdc20, которая входит в состав комплекса APC^Cdc20. Удаление ингибитора Emi1 обеспечивает активацию комплекса APC^[9].

Примечания

Литература

• Morgan D. O. The cell cycle: principles of control. — New science press, 2007. — P. 47. — 297 p. — ISBN 978-0-9539181-2-6.
• Lori A. Passmore, David Barford. Getting into position: the catalytic mechanisms of protein ubiquitylation (англ.) // Biochemical Journal. — 2004. — No. 379. — P. 513—525. — doi:10.1042/BJ20040198.
• Hartmut C. Vodermaier. APC/C and SCF: controlling each other and the cell cycle (англ.) // Current Biology. — Elsevier Ltd., 2004. — Vol. 14. — P. R787—R796. — doi:10.1016/j.cub.2004.09.020. (недоступная ссылка)
• Pasquale Fasanaro, Maurizio C. Capogrossi, Fabio Martelli. Regulation of the endothelial cell cycle by the ubiquitin-proteasome system (англ.) // Cardiovascular Research. — 2010. — No. 85. — P. 272—280. — doi:10.1093/cvr/cvp244.

Эта страница в последний раз была отредактирована 9 августа 2023 в 22:43.